IHC студија - помош во дешифрирањето на биологијата на ракот на дојка

И покрај фактот дека се повеќе и повеќе клиники почнуваат да се користат техники на генетска phenotyping на тумори IHC студија што останува и денес главна алатка во дешифрирањето на биологијата на ракот на дојката, во предвидувањето на нејзиниот иден развој "индикатор" на туморски одговор на планираниот третман.

Во овој напис ќе научите што имунохистохемиското (IHC) студија, значењето на IHC има рак на дојка.

Histochemistry (делови во хистологија обојување)

Пред патолог (морфологија) започнува во ткивото на градите микроскоп дел добиени од биопсија, тоа е потребно да се боја на неговиот специјален бои.

Хистохемиски бои применува на тенки секција на сајт ткиво за да се види под микроскоп, клетки кои се присутни таму, нивниот аранжман во однос на едни со други (структура на ткивото). Светлосен микроскоп е рутинска метода за студирање прободени делови ткиво, широко се користи во дијагнозата на рак на дојка. делови од најчестите боење ткиво со помош на:

• Hematoxylin - тоа дамки на клеточното јадро во темно сина боја;
• Еозин - што розова цитоплазмата на клетките. Споделување на нив со hematoxylin-еозин наречен боење.

Што е имунохистохемија (IHC)

Патолог - лекар, кој долго време студирал на Медицински универзитет, да се знае како да се користи микроскоп за да се направи разлика на обоени делови рак клетки од нормалното ткиво. Обично дијагноза (бенигни или малигни патологија е) тоа е доволно за да се разгледа во деловите микроскоп ткиво прободени со hematoxylin и еозин. Но, понекогаш тоа не е доволно. Во оваа ситуација, на помош доаѓа имунохистохемија, која е морфолошки идентификација на клетките и ткивата додава имунолошки компонента.

Метод за имунохистохемија (IHC) за откривање на морфолошки комплементи на клетки и ткива употреба на антитела на познати антигени кои се специфични за одредени типови на клетки или клеточни компоненти. Локацијата на овие антитела може да се види со користење на светлосен микроскоп, со оглед на антитела се состојат визуелно признае таг.

Првата техника имунохистохемиска анализа на рак на дојка со користење на антитела со прикачен флуоресцентни ознаки, кој бара употреба на специјални флуоресцентни микроскопот, дозволувајќи им на локализација на овие антитела видите намалување на ткивото на градите.

Во текот на изминатите 30 години значително поедноставување на техника која се користи за истражување IHC рак на дојка, преку употреба на специфични антитела (моноклонално антитело) со етикета ензимски. Ова, пак, им е дозволено користење на светлосен микроскоп со истражување immunohistological рак на дојка, што е многу поевтино и затоа се повеќе достапни. Сепак, радиоактивни елементи (пероксидаза, алкална фосфатаза и флуоресцеин), без кој понекогаш не бараат посебни техники и се уште се користат.

Потребата од користење имунохистохемија на ракот на дојката, контрола на квалитет и интерпретација на резултатите треба да се следат патологија оддел. Важно е дека податоците добиени на декодирање IHC студијата се користат само заедно со морфолошка анализа на ткивото на градите, добиени со боење со hematoxylin и еозин.

Денес имунохистохемија на ракот на дојката е рутински метод во морфолошки (хистопатолошка) лабораториите и се користи за дијагноза и прогностички цели, како предвидливо (предвидлив) покажувачот се однесуваат како рак на дојка во иднина.

Дијагноза на рак на дојка и IHC

Кога патологот гледа под микроскоп биопсија материјал, тој се соочува со две основни дијагностички задачи: се утврди потеклото на туморските клетки, каде што беа (во канали, во резени, или во други делови на дојката) и потврди или отфрли нивната инвазија на околните ткива.

Дијагностички IHC маркери се користи за рак на дојка

Од првите денови на употреба во онкологијата IHC беше спроведена потрага по нови и подобрени техники ги користат постоечките антитела кои можат да се идентификуваат клетки антигени со висока специфичност и сензитивност. Следните IHC маркери се сега широко се користи за да се појасни хистопатолошки дијагноза на рак на дојка:

cytokeratins

• CK5, CK10, CK14 и CK17 се cytokeratin базалните слој на епителот, myoepithelial клетки изразена.
• CK5 / 6 или "базалните cytokeratins" помогне да се идентификуваат нормален градите myoepithelial клетки, како и ламинарен (секретираат).
• 34 12: антителото помага да го признае cytokeratins 1, 5, 10 и 14.

Маркери на мазните мускули

• H-caldesmon. Тоа може да се најде само во градите дуктална myoepithelial клетки, така што има висока специфичност.
• Мазните мускули актин (SMA). Ова антитело помага да се открие актин во mikrofilamentah- ниска специфичност, бидејќи SMA е откриен во фибробластите (во ткивата кои се регенерираат).
• Миозин со тежок ланец на мазните мускули (SMMHC) - структурна компонента во мазните мускули миозин изоформ SM2. Изразено myoepithelial клетки на дојката, има висока сензитивност и специфичност, како SMMHC присутен само во myoepithelial ќелии подредени во каналите и резени на млечните жлезди, но не и во фибробластите на сврзното ткиво на жлездата.
• Calponin - полипептид од 34 kDa, модулира активноста на actomyosin. Добра чувствителност, но е присутна во Млечна фибробластите на сврзното ткиво.
• P63-p53 хомолог - нуклеарна маркер е многу чувствителна myoepithelial клетки.
• CALLA: Endopeptid, која е изразена во myoepithelial клетки.
• P-cadheriмолекула на клеточната адхезија со висока чувствителност на myoepithelial клетки на нормална ткивото на градите - n. Тоа не реагира со фибробластите.

други маркери

• Е-cadherin - клеточната адхезија молекула. Тоа се користи за да се направи разлика дуктален карцином "во suti" (DCIS) на lobular. Карцином "во suti" (LCIS) - DCIS, обично идентификувани од страна на боење на мембрана, што е спротивно на LCIS, во кој тоа не е.
• маркери на меланом: S100, Melan-A, HMB45.
• лимфоцитен маркери: CD20, LCA, CD15, CD30.
• васкуларните ендотелиални маркери: CD31, CD34, фактор VIII, d2-40 (podoplanin).
• маркери на клеточната пролиферација: Ki67, MIB-1, PPh3.
• апоптоза маркери: Bcl-2 и Bax, Bcl-X.

Примери на употреба на IHC за решавање на проблемите во одредувањето на дојка патологија

Постојат многу ситуации во кои имунохистохемија придонесува за формулирањето на крајниот хистопатолошка дијагноза во мајчиното патологија:

• Боење Е-cadherin клеточната мембрана елиминира lobular неоплазија (ALH) и LCIS. На недостаток на боење клеточната мембрана фаворизира lobular тумори.
• Нормално епителна хиперплазија, епителните атипија или овој или оној DCIS. Во бенигна хиперплазија може да се открие реактивност на CK5 / 6 и CK14, а со атипична хиперплазија и DCIS не.

Овој микро инвазивен карцином или нешто друго? Примена myoepithelial клеточни маркери е од клучно значење во одредувањето на тоа дали или не инвазија микро-карцином (инвазија на ламинарни слој во myoepithelial клетки). Реактивност на фибробластите, јазот во боење на клетките, myoepithelial боење на васкуларните мазни мускулни клетки може да предизвика тешкотии во толкувањето на набљудуваните модел под микроскоп. Две маркери myoepithelial клетки кои се користат во оваа ситуација, на пример, p63 и SMMHC или Асма, или calponin.

Што IHC маркери се користи во дијагностички панели во патологија на дојката

А во собата на маркери (дијагностички панел), кој се користи во рамките на студиите IHC на ракот на дојката, во голема мера зависи од опрема на лабораторијата во која треба да се спроведе имунохистохемија и искуството на лекарот спроведување. Подолу се дадени препораки кои IHC панел треба да се користи кога патологија на дојка, доколку една од клиниките:

• Миозин тешки ланци на мазните мускули (SMMHC) или calponin - чувствителни и специфични маркери на myoepithelial клетки цитоплазмата;
• Мазните мускули актин може да се користи, но сепак во толкувањето треба да се има на ум дека тој е присутен во фибробластите (воспаление и лузни);
• P63 е чувствителна и специфични маркер до јадра myoepithelial клетки боење но може да биде дисконтинуирани. Употреба на маркер во цитоплазмата myoepithelial клетки, како што SMMHC или calponin, треба да се користи за да се избегнат било какви проблеми во толкувањето на сликата добиени.

Кога се обидува да се утврди присуство или отсуство на myoepithelial клетки и p63 треба да се користи SMMHC или calponin.

Улогата на имунохистохемија во дефиницијата на "прогресивен" и "предвидливо" фактори за рак на дојка

Прогностички фактори се обезбедат информации за можното однесување на рак на дојка во времето на дијагностицирање и се независни од терапијата. Тоа е, со помош на нив може да се суди како ќе напредуваат брзо и рак, соодветно, во зависност од тоа да се одлучи колку и третман предност во секоја ситуација.

Од друга страна, "предвидливо" (предвиди) фактори обезбеди информации кои дава индикација на веројатноста за туморски одговор на одредена терапија. И покрај фактот дека прогностички и предвидливо фактори можат да организираат одделно во дијагноза и класификација на рак на дојка почесто се прогностички и предвидливо.

На пример, во присуство на висока експресија на HER2. Ако рак на дојка HER2 позитивен (голем број на HER2 протеини во тумор), потребно е агресивен, со почетокот на метастази во далечните органи. Но, ако туморот содржи мала количина на овој протеин (рак на дојка HER2 негативни), тоа нема да одговори на употреба на насочени дрога Herceptin.

"Базалните" IHC маркери

Постои поделба рак на дојка зависно од тоа кои гени изрази својата клетки (генската експресија профил). Тумори на профилот кој е карактеристичен за базалните или myoepithelial клетките на нормалните дојка, ќе се покаже присуство на "базалните" маркери. Таквите тумори имаат лоша прогноза. Во повеќето од овие "базалните" тумори целосно отсутна ER, ПР (рецептори за естроген и прогестерон) и на HER2 протеин. Тие често метастазираат во мозокот, белите дробови.

Денес не постои консензус за имунохистохемиското профил (IHC маркери, кои треба да се применат), кој јасно ќе се дефинираат "базалните" ракови. Овие тумори со лоша прогноза вклучува т.н. "троен негативни рак на дојка", во која нема скоро време, односи со јавноста и HER2, но изрази базалните cytokeratins 5/6 и 14, рецепторот на епидермалниот фактор на раст (EGFR) и C-KIT. Тие, исто така може да се изрази P-cadherin и често p63.

Постојат сличности помеѓу "базалните" рак на дојка и рак, кои се откриени кај жени со BRCA1 мутација.

EGFR често се изразува во "базалните" рак па пациентите со таквите тумори може да имаат корист во третманот на EGFR инхибитори.

IHC маркери на пролиферација (стапка на раст на тумор)

Бројот или процентот од митотски клетки во митоза, долго време се смета морфолошка "биомаркер" прогнозата на ракот. Постојат голем број на IHC маркери кои покажуваат пролиферативната активност на клетките (број на митози):

• Ki67 - антиген што се изразува во јадрата на клетките во сите фази на клеточниот циклус и е корисен маркер на пролиферацијата на клетките;
• MIB1 - антитело кое реагира со Ки-67 во ткиво, или формалин-фиксна парафин;
• PPh3.

IHC маркери на апоптоза

Апоптоза, или "програмирана клеточна самоубиство" е биомаркер агресивни тумори. апоптотични протеини може да се идентификувани од страна на IHC:

• Bcl-2;
• Bax;
• Bcl-X.

Други "прогресивен" маркери

• p53. Мутации во тумор супресорен ген на p53 (TP53), откриени во 20-30% од случаите на рак на дојка. Овие генски мутации се почести кај жените со наследни синдроми на рак на дојка отколку жените со спорадичен рак. За пациентите со генетска предиспозиција за рак на дојка може да се препорача тестирање p53. За откривање на мутации во p53, исто така, се смета како можен индикатор за одговор рак на дојка на хемотерапија, но за откривање на p53 протеин со имунохистохемија во тумор не се одразуваат на статусот на мутација на p53.
• Топоизомераза II-алфа. Тоа е целта на кои акција е насочена антрациклини - хемотерапевтски лек кој често се користи во третманот на ракот на дојката.